本发明涉及基因工程领域,具体的说是一种厌氧梭菌组成型高效表达启动子及其应用。启动子如下述:a)序列为列于表1中所示的DNA片段;b)与a)限定的核苷酸序列具有90%以上同源性,且具有启动子功能的DNA片段;c)严格条件下与a)或b)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA片段。本发明中在厌氧型解纤维梭菌中高效表达组成型启动子的发现,主要是采用核黄素单核苷酸依赖的荧光蛋白(FbFP)为报告系统的方法进行筛选的,通过将其培养在以五种不同碳源为底物的培养基中获得大致相同程度的表达量,其启动下游报告基因表达的活性是在丙酮丁醇梭菌中分离到的高效表达的组成型启动子pthl(硫解酶的启动子)的1.5倍。本发明中的组成型高效表达启动子对于革兰氏阳性细菌的外源基因表达、遗传改造有重要意义,同时也丰富了合成生物学的遗传元件。
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