本发明提供了一种鲟鱼CRISPR/Cas9基因编辑方法,是将Cas9蛋白与靶基因gRNA混合后,利用显微注射的方式,注射到受精时间不超过20分钟的鲟鱼1细胞期受精卵的动物极的受精孔中。将100 ng/µL Cas9 nuclease蛋白与30 ng/µL gRNA混合,采用显微注射方法,将混合物导入小体鲟1细胞期受精胚的动物极,孵化后可获得靶基因突变率高达83.1%的小体鲟胚胎,从而建立小体鲟靶基因精准编辑技术。靶基因发生突变的小体鲟胚胎可通过PAGE方法筛选获得。该技术既可以用于研究鲟鱼基因的功能,又可以用于精准修饰鲟鱼内源靶基因,培育遗传改良的鲟鱼养殖新品系。
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