本发明公开了一种利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法,包括如下步骤:(1)灵芝原生质体构建:①灵芝液体培养菌丝体制备;②菌丝体匀浆制备;③细胞壁溶解酶液制备及细胞壁溶解;④原生质体分离及收集;⑤原生质体浓度校正及保存;(2)低温等离子体诱变原生质体:①原生质体诱变前准备;②等离子体诱变装置通气平衡;③反应体系通电,对原生质体进行诱变;④原生质体平板涂布均匀和静置再生培养;⑤诱变菌株挑选;⑥观察记录菌落形态及生长速率,光镜下观察菌丝形态;⑦诱变菌株的活性物质和稳定性检测;⑧保存菌种。本发明的优点在于:提供了一种稳定高效的利用等离子体诱变灵芝原生质体以构建突变菌株的方法。
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