本发明涉及一种基于去SUMO化酶和阴离子交换色谱的SUMO化修饰肽段的富集方法,首先将蛋白质样品的碱性位点酶解成多肽,在肽段水平封闭肽段的N末端和侧链的自由氨基,然后采用阴离子交换色谱预富集多肽中保留较强的SUMO化肽段,再对收集到的SUMO化肽段用去SUMO化酶进行去SUMO化,发生去SUMO化后的肽段在阴离子交换色谱中的保留将变弱,将样品再一次经过阴离子交换色谱,收集不保留的流份,通过将去SUMO化修饰的底物肽段与其他干扰肽段分离,实现对SUMO化修饰肽段的二次富集。本发明的优点是选择性高、富集效率高、可同时富集多类型的SUMO化修饰肽段、提高了SUMO化修饰位点的鉴定覆盖度。
院属单位:中国科学院大连化学物理研究所
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