本发明公开了一种生产ω‑1‑羟基脂肪酸的方法。以NADH类似物依赖型的细胞色素P450为生物催化剂,以NADH类似物为辅因子,催化底物脂肪酸次末端C‑H羟基化,生成ω‑1‑羟基脂肪酸。NADH类似物依赖型的细胞色素P450可用于与再生NADH类似物的再生酶及对应再生底物偶联催化下,利用NAD类似物为辅因子,生成ω‑1‑羟基脂肪酸。该NADH类似物依赖型细胞色素P450酶可用于构建生物正交的不依赖天然辅因子NADPH的合成羟化脂肪酸的代谢途径,实现P450酶催化的能量消耗与内源能量代谢解偶联。
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